宏基因检测（NGS）在病源微生物检测中的应用 城市供水及饮用水中微生物如何快速检测 这几个单位的对比给出答案！ 健明迪

培育基的灭菌及运用

1.每次配置时，要留意其消费日期能否在保质期内，检查其开瓶日期及瓶口密封性，保证其未蜕变，并且未吸潮。

2.培育基配置时，称量要准确，包括盐水的分装要准确。

3.一定要保证现配制现灭菌，未灭菌的配好培育基不能长时间放置，更不可隔夜。

4.灭菌时要保证恒温、恒压，同时要保证有效灭菌时间。

5.灭菌过的培育基要冰箱保管，可保管一周，普通不超越 3 天。而且要遵照“先入先出”准绳，先配制的要先运用。

6.在运用时，要依据当班次的运用量，用水浴锅先将培育基溶化为液态，然后及时调低水域温度（先化好的可从水域取出，放在水浴锅锅盖上）待用，千万不可长时间使培育基处于高温形状。

7.做产品微生物检测时，倾倒培育基温度在 45℃左右，不可过烫，防止将菌烫死；也不可过凉，化好的培育基又结块凝结，方便于观察结果。

8.每瓶培育基均要做空白。

9.尽量集中做样，防止频繁翻开同一瓶培育基瓶塞，增大培育基的污染几率，出现误差结果。

10.培育基剩余过少时，可先将其倾倒成空白用板。

做样环境的维持

一、大环境（房间）

1.做样时，窗户和空调要封锁，或用酒精对房间停止喷雾消毒，防止房间内空气流通影响超净台外部环境（*好在有通排风系统的恒温恒湿无菌间停止操作）。

2.假设在原来的原料微生物检测室停止做样，要活期开启紫外灯，对房间停止杀菌。

二、小环境（超净台）

1.活期清洁初效过滤器，要及时改换。

2.做样前，将超净台外部停止清洁，用 75%酒精停止擦拭消毒，并提早半小时将超净台紫外灯翻开，对超净台外部环境停止杀菌。

3.关紫外灯，开风机，调整适宜进风量，风量不可过低。

4.每次做样后，要对超净台外部停止清算、清洁，并用 75%酒精停止擦拭消毒。

5.紫外灯依据其运用寿命要及时改换。

6.做样同时，要做上相应菌落检测的环境空白。

7.做样区域的选择：

①普通在距离超净台外沿的 1/3-2/3 区域停止无菌操作；

②要在酒精灯火焰的外焰维护区域停止操作。

工用具的洁净度

1.玻璃器皿：采用干热灭菌方式停止灭菌。

2.做样用剪刀、勺子等物品要做到做样公用，不可与其它操作用具混用，运用时，先用75%酒精消毒，再采用灼烧方式停止灭菌。

3.接种针（环）采用灼烧方式停止灭菌，但要留意做样时要先将接种针（环）停止冷却。

样品的采集及检测

一、保证采样用具的无菌性

1.玻璃器皿：采用干热灭菌方式停止灭菌，保证恒温、时间足够（但不可时间过长，招致玻璃器皿易裂纹而报废）。

2.取样筐：运用前要用 75%酒精停止喷洒消毒

3.取样勺、浓奶取样提子：要保证其清洁消毒，清洁后用 75%酒精停止擦拭消毒。

4.取样袋：可现用酒精停止擦拭消毒，再在超净台用紫外灯照射消毒，（包卸车间要在传递窗用紫外灯照射消毒）。

5.电子称外表用 75%酒精消毒。

二、人员操作

1.保证手部的清洗、消毒：取样前及做样前都要先洗手再消毒。

2.取样要具有代表性（随机样、目的样、综合样）且要标示清楚。

3.取样终了，不可在车间逗留，要及时将样品放入超净台，对其外表面停止紫外灯照射消毒。

4.在要求的做样区域停止操作。

5.做样前，要用 75%酒精棉球对样品袋口部停止擦拭消毒，再启齿。

6.往盐水瓶加样品时，要留意勺子或袋子尽量不接触瓶口。

7.样品计量要准确，稀释倍数也要准确（1mL 吸管不允许将管口敲掉），停止 100 倍稀释时，1mL 吸管要伸入盐水中，不可以将样品管壁流下去，同时要防止将管底部捅破。

8.盐水温度以 40℃左右为宜，不能过热，将局部微生物烫死，也不能温度太低，不能将奶粉溶解完全。

9.停止稀释时，要摇匀，保证溶液的均一性。

10.倾倒平皿时，要留意培育基瓶口不要接触到平皿；倾倒的培育基要过量，不可以太少，在培育进程中干掉，微生物亦死亡，以 15mL 左右为宜。

11.做大肠菌群样时，要提早将乳糖胆盐培育基培育管按需求量备好，放入超净台对外表面停止紫外线灭菌。

12.接二步时，要留意先将接种针（环）停止冷却，防止出现接不上菌落的状况发作，招致无法判别、确认。

13.做样终了，及时放入相应培育箱停止培育，并清算清洁超净台。

微生物的培育

1.在培育进程中，要随时监控培育箱温度，保证其在适宜的温度停止培育。

2.要依照《微生物检验规范》要求及时观察结果，出现异常，要及时剖析缘由停止反应。

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