化妆品检测报告你了解吗 这几个案例解锁新规下的化妆品功效评价与检测 健明迪

　　化妆品是指以涂抹、喷洒或许其他相似方法，散布于人体外表的任何部位，如皮肤、毛发、指趾甲、唇齿等，以到达清洁、颐养、美容、修饰和改动外观，或许修正人体气息，坚持良好形状为目的的化学工业品或精细化工产品。

化妆品需求做检测产品类别：

　　1）清洁类化妆品：洗面奶、卸妆水（乳）、清洁霜（蜜）、面膜、花露水、痱子粉、爽身粉、浴液、洗发液、洗发膏、剃须膏、洗甲液、唇部卸妆液等。

　　2）护理类化妆品：护肤膏霜、乳液、化装水、护发素、发乳、发油/发蜡、焗油膏、护甲水（霜）、指甲硬化剂、润唇膏等。

　　3）美容/修饰类化妆品：粉饼、胭脂、眼影、眼线笔（液）、眉笔、香水、古龙水、定型摩丝/发胶、染发剂、烫发剂、睫毛液（膏）、生发剂、脱毛剂、指甲油、唇膏、唇彩、唇线笔等。

化妆品检测项目：

　　1、微生物相关测试

　　1)菌落总数、霉菌和酵母菌总数、粪大肠菌群、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌等.

　　2)微生物限制测试、微生物灭杀效果测定，微生物污染鉴定、微生物存活实验、微生物通透性测试等.

　　3)重金属污染测试铅、砷、汞、总铬等.

　　2、限用物质剖析

　　1)糖皮质激素:地塞米松、曲安奈德、泼尼松等41项.

　　2)性激素:雌二醇、雌三醇、雌素酮、睾酮、甲基睾酮、乙烯雌酚、孕酮.

　　3)抗生素:氯霉素、四环素、金霉素、甲硝唑、盐酸多西环素、二水土霉素、盐酸美满霉素.

　　4)塑化剂:邻苯二甲酸二甲酯（DMP）、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二正丙酯（DPP）、邻苯二甲酸二正丁酯（DBP）、邻苯二甲酸二正戊酯（DAP）等.

　　5)染料:P-苯二胺、O-苯二胺、m-苯二胺、m-氨基苯酚、p-氨基苯酚、甲苯2,5-二胺、p-甲氨基苯酚.

　　6)香料:酸性黄36、颜料橙5、颜料红53:1、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅳ.

　　7)着色剂:酸性黄36、颜料橙5、颜料红53:1、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅳ.

　　3、防腐测试

　　1)防腐剂含量：卡松、苯氧乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸异丁酯、对羟基苯甲酸异丙酯。

　　2)防腐应战金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、黑曲霉、白色念珠菌。

　　3)抗菌测试杀菌、抗菌、抑菌效果评价。

　　4)毒理学测试单次/屡次皮肤抚慰，眼抚慰，阴道黏膜抚慰，急性经口毒性，皮肤变态实验等。

　　5)成效测试保湿、防晒、美白等。

　　6)毒理性风险评价效劳

　　7)国产非特殊用途化妆品备案测试

往年，随着《化妆品监视管理条例》、《化妆品分类规则和分类目录》和《化妆品成效宣称评价规范》等新法规的先后公布和实施，对整个行业的迷信安康、有序开展提出了更高的详细要求，在产品的平安性、评价要求和成效宣称方面都制定了相应的规范。

近日，围绕新法规下企业关心的成效评价方面的效果，博溪生物总经理卢永波在由聚美丽主办的“2021化妆品产学研医技术论坛”宣布了《新规下化妆品成效评价与检测》主题演讲，经过火享一系列成效评价的案例，并给出相关处置方案。

这是化妆品成效评价与检测的一线总结，在快速开展的市场环境以及新规下，不论是启用3D皮肤模型等实验室方法，还是运用分子生物学的方法，在这套技术体系里对行业规范或许企业都有自创意义。

本文是此次演讲的局部精髓内容，经卢永波自己审核。

我们不时从事皮肤3D模型和相关测试工具的开发，同时，也树立了一系列用于化妆品平安和成效测试的方法体系。基于阅历，再结合近一两年的监管趋向，我明天借聚美丽的平台，和大家做下交流。

关于新规的公布，站在我们的角度来看，至少会惹起三方面的革新。首先，要求企业产品宣称契合法规的基础要求;其次，在产品设计寻求差异化时如何研收回更好的产品会成为全行业的思索;另外，宣称上，要求企业树立更好更高效的消费者和产品交互的言语。

而在做第三方成效评价的时分，需关注这四个基本的准绳——迷信性、真实性、牢靠性、可追溯性。企业自己评价项目也要契合这样基本的要求。另外，还要树立一个规范的实验室，对报告的真实性停止担任。

未来几年，无论是实验室方法，还是人体方法，尤其是在规范树立的大背景下，会推停止业的规范和提高。

实验室方法在化妆品成效评价中的运用：三层级、4M准绳

内行业里我们都有哪些可选择的成效评价方法?

首先要强调的是，我觉得一个迷信的化妆品成效评价一定是多维度的。

目前行业里主要有三个层级。*个层级，细胞分子的相关目的。比如说做一个抗氧化的，需测一个ROS目的，而做一个抗皱的，可以做一个IV型胶原蛋白目的等，这就是一个单分子目的的检测体系。

这里需求留意的是这个目的测试的结果与人体*终的成效差异多大是不确定的，这也是我们为什么鼓舞做多层级数据的缘由之一。

第二个层级，运用离体的组织，3D皮肤模型等，主要在组织维度的工具和方法上。基于这样的体系，我们可以在形状学上到达一站式的检测，这样可以把分子层面到真实的人体层面有更好的过渡。

第三个层级，在一些成效宣称的方向上，提取一些人体方面的数据支撑。

另外，在全体的实验室技术体系引见里，它需契合四个M的准绳，区分是机制 Mechanism、目的 Markers、模型 Models与方法 Methods。

机制 Mechanism：树立皮肤成效形状面前的细胞分子机制，由于我们做任何成效方向的评价、研讨或许活性物选择都脱离不开对特定成效方向机理上的研讨。

目的 Markers：从不同皮肤形状的发生机制失掉对应的检测目的，用于反映皮肤成效的变化。

在机理研讨层面上，会描写出更易于检测和实施的靶标，这些都是在方法学里十分关注的目的。在这个目的之下，我们需选择适宜的模型。

模型 Models：依据皮肤形状发生的机理，同时结合体外现有的基础模型挑选*的造模条件。

那么模型选择的依据是什么?首先模型Models要具有生理才干，第二模型需与评价对象的配伍和兼容。

方法 Methods：关于挑选的检测目的，在组织、细胞、蛋白、基因等不同水平选择对应的检测方法开发与验证。

我们会经过一些现代分子生物学的方法，以及理化的方法Methods，对它停止测定，全体上构成评价技术的基本体系。

体外方法在化妆品成效评价上的运用及案例

我们曾接触到一家企业，他们有上百个特证产品，但是从未做过人体成效测试。这意味，他们产品卖了一两年缓冲期之后便下架，面临着重新开发新产品。但是我们知道法规规则的特证产品都是需求停止人体测试的，且行业那么大，产品这么多，有多少的比例是属于概念性添加?

提到人体测试时，不少人对此没决计。那么，在正式人体实验之前，有没有相关数据库能先帮大家停止剖析等?接上去，我讲一下——体外方法在化妆品成效评价上的运用及案例。

1、美白成效

有些公司有一定开发技术基础如美白剂(具有一定的美白成效)等，如何停止体外的预筛，然后停止人体测试。

我们把产品涂抹在3D黑素皮肤模型的外表，经过一系列的目的，可以直观看到产品运用后皮肤模型表观颜色究竟是白还是黑了。另外也可以测定表观亮度L值，黑素的散布和含量等相关目的。

我们来看一个详细的案例，雅诗兰黛专研光透焕白精髓素。

我们可以看到色度，在UVB组的照射下，抹了该产品之后，色度清楚比对照组要淡一些，这是十分直观的美白效果，其他的量化目的也能证明这点。右下角的组织学里出现的黑素散布形状，其结果不只可以通知我们这个产品的原理究竟是抑制黑素分解，还是抑制黑素的转运;同时可得知，假设组织学结构十分完整的话，这个产品的平和性很高。这是我们在美白上的运用。

2、防脱成效

关于防脱产品的成效，行业的决计度是很低的，行业里也缺乏真正有效的防脱自然活性原料。只能寻觅更多自然或许中药的提取物来处置这个效果，但是有一些原料虽有一定的成效，但是成效表现不够冷艳。

从防脱机理来说，有三点。*5α恢复酶抑制剂;第二毛乳头生临时经过营养液调理;第三让休止期的毛发重新进入生临时。

另外从评价技术来看，可以与医院协作——提取离体的毛囊，然后经过离体的毛囊，测生长毛囊的大小，还包括毛乳头一些凋亡的状况等。经过直观的形状学，再结合一些相关的因子表达，可以综合地剖析待测的物质有没有防脱成效。

当然还可以做更深层次的研讨，比如H2O2-毛乳头细胞(DPC)、DHT-毛乳头细胞(DPC)，可以检测到不同细化目的的毛乳头细胞的表现状况，这一体系不做详细引见了。

回到防脱产品的开发状况，我觉得*主要需求找到一个切入点。究竟是在生临时处置营养性的、因子性的效果，还是休止期处置毛囊干细胞重新激活的效果，这是*步。

然后我们关于一个未知的提取物需结合网络药理剖析，一方面剖析这个原料物质能够存在的靶向基因;另一方面是对标的疾病，包括防脱，以及面前调控的相关基因。如左边这个图，其实前端的任务，至少整合了双边几千个基因做少量数据剖析。

如今来看一下详细产品案例，是一个某乌发作发液。中心点主要是TGF-beta，AR，Wnt，PI3K-AKT这四个通路上。这里有一点要说明，假设有一个未知的物质，它的富集跟脱发相关，或许是抑制脱发相关的通路越多，它就更有能够在真正的产品端起到防脱的成效。剖析完后，接上去可以做更多的延展性、细化的任务，这点是特别需求更多资源的投入。

这里有一个复杂的离体毛囊的培育，区分有四个组别，可以直观看到在不同组别里毛发的生长的效果。另外也可在毛乳头区域，看到它凋亡的状况，像这个白色箭头指示区域，过几天这个毛发就会脱掉，如把这个现象抑制住，将会是一份十分直观的检测防脱成效的效果图证明。

我们在直观检验完之后，再配套产品的开发，从不同的通路停止包装，以提升我们产品科技的属性。

3、屏障修复

第三个案例，我想分享的是屏障修复和抗炎，也叫免疫调控。

从评价角度来看，有两个中心的，一个是免疫调控，是治标的效果;一个是屏障修护，如何自动增强皮肤表层屏障，以及砖墙结构的恢复功用。

目前，我们汇总的活性物和产品，大致从机理上剖析，有三条主要的通路。*条是抚慰性反响，第二条是过敏性反响。中国无论是抚慰现象还是神经性招致的过敏现象，都会叫过敏，但临床上，真正的过敏现象比例是较低的。第三是神经性的敏感。*近比拟火的像CBD，包括神经肽类，抑制神经递质分泌的都是属于这个类别。

所以从免疫调理角度来讲，所触及到的目的，都可以从原料和评价剖析作为切入点。

另外一个，屏障修复。假设我们对皮肤的分化结构停止细致剖析的话，屏障相关目的其实十分多，尤其EDC复合体，大约有65个基因左右，跟皮肤的屏障结构高度相关。此外，还有一些衔接蛋白、骨架蛋白/KIFs等。所以我们在这里所提取的目的，就不单单是可以作为我们原料的包装点，也可以作为它的一个评价点。

举个例子，这是基于3D的皮肤模型做的染色的结果。我们可以看到，在不同的处置方式之下，FLG、LOR，都会表现出不同的表达丰度，尤其在NC对照下，这个FLG、LOR表达就会有一个清楚下降。

还有前一段时间检测的雪果精髓，经过SLS抚慰表皮模型发现：抚慰后表皮形状会退步，同时分泌出一系列的炎症因子，我们可以直观地看见产品看对炎症因子能否起到抑制造用，以及从免疫调控的角度来看产品的成效。

第二个方面，是FLG、LOR的CE屏障高度相关的蛋白质。可以看到阴性对照组，这个蛋白含量是降低的。加了这个产品之后，和阴性对照组比，有一个清楚性的提升。经过这样的细分目的可以说明这个产品具有屏障自动修复的成效，而且和临床的正常皮肤屏障自动修复的相关性也是比拟高的。

4、抗衰老

在抗皱方面，主要触及到三个主要工具，成纤维细胞、体外重组全层皮肤模型、离体皮肤组织。其中离体皮肤组织，化妆品可以在表皮上直接停止涂抹，这样可观察它全体的皮肤变化。

但这个技术体系有个难点，主要是临时培育。这个产品在相对长的时间里，看它对皮肤究竟发生什么样的变化。首先我们要优先保证离体皮肤在体外可以维持两周以上的生长培育，但正常的细胞三天便片面地凋亡。

结合现有丰厚的相关目的、检测模型，可以挑选用哪个活性物作为我们的配方。

首先需做个初筛，这个初筛主要基于一些高性价比细胞模型，经过这个目的可以看到MMP和ROS抑制效果比拟好，然后停止组合。

另外一些可视化的结果，像胶原的分泌，可以协助我们确定特定的原料以及它的成效。详细到产品，我们也会用到相关相似的方法，像刚才提到的ROS、MMP、COL1，还有一些更重要的，我们会用三维的效果，来看它在组织形状上有什么综合的表现。

这是我们前一段时间接触的含视黄醇类的抗皱修复产品。这个产品经过组织学比拟，与阴性对照组对比，可看到实验组表皮层增厚，这跟视黄醇的一些基础功用相关。第二看结构，比如I型胶原蛋白，表达丰度有没有提高。我们知道在衰老皮肤中，DEJ结构退步比拟严重的。

异样我们也可在胶原纤维的染色密度上作比拟，左边这个胶原散布密度图，远远高于阴性对照组，还可在弹性纤维表达散布上停止相关的检测。这样的检测结果更有利佐证产品在抗皱上的成效，同时也可以作为与其它产品差异化的成效包装。

说到差异化，行业里普遍用美白、保湿、控油等统称，所以我们应该思索如何停止更好的差异化宣称。首先差异化的宣称，它是为一级宣称效劳的，我们可以衍生出更好的市场故事。比如修护，可用水润修复;其次把水润的相关目的停止迷信的关联。第三把配方原料里的目的停止检测。这样一个逐层的逻辑，做到详细的实测目的，然后再倒推，经过这样的证据数据支持，来验证水润修复效果。

所以整集体系对皮肤分子机制的验证，细胞的靶向，包括婚配的原料和产品，是一个系统化的工程，这样可以到达差异化宣称的目的。

从全体下去看，化妆品成效的评价、成效产品的开发，都是从皮肤的生物学目的末尾的。

我觉得这是一个新的时代，对我们做技术的人员来讲，是十分好的鼓舞。而这个生物目的，中间需求多维度的成效评价方法停止衔接，目前没有一个独立的成效评价方法来处置所遇到的效果。

忠于消费者的体验，把消费者的价值*化。虽然这外面触及到方方面面的迷信，但我置信把全行业整合起来，可以带来庞大的提高。

博 溪生物不时在一线，专注于系列3D皮肤模型开发和产业化，专业聚焦于化妆品、口腔护理、发用品以及婴幼儿护理等产品的平安与成效评价，十分快乐无时机和大家分享我们的阅历，谢谢大家。